SARS-CoV-2 determină o infecție respiratorie denumită COVID-19 (Coronavirus infectious disease 2019), cu perioadă de incubație medie de cca 5 zile (limite 2-14 zile). Boala este caracterizată prin simptomatologie predominant respiratorie (febră, tuse, dificultăți de respirație) de intensitate moderată în cca 80% din cazuri, dar poate avea manifestări severe (pneumonie bilaterală interstițială), cu evoluție către insuficiență respiratorie, detresă respiratorie acută (ARDS) fiind principala cauză de mortalitate. 

Cine ar trebui să fie testat pentru infecția actuală?

• Persoanele care au simptome de COVID-19.
• Majoritatea persoanelor care au avut un contact strâns (distanța 1.83 metri pentru un total de 15 minute sau mai mult pe o perioadă de 24 de ore) cu cineva cu COVID-19 confirmat.
• Persoanele complet vaccinate ar trebui să fie testate la 3-5 zile după o expunere cunoscută la cineva cu COVID-19 suspectat sau confirmat și să poarte o mască în interiorul publicului timp de 14 zile sau până când primesc un rezultat negativ al testului.
• Persoanele care sunt testate pozitiv COVID-19 în ultimele 3 luni și s-au recuperat nu trebuie să fie testate în urma unei expuneri, atâta timp cât nu dezvoltă simptome noi.
• Persoanele nevaccinate care au luat parte la activități care le prezintă un risc mai mare pentru COVID-19.

Tipuri de teste:

Sunt disponibile teste COVID-19 care pot detecta infecția actuală sau infecția din trecut. Un alt mod de a spune, testele pentru Covid-19 pot fi împărțite în teste de antigen sau anticorpi, ambele folosind diferite tipuri de probe pentru a căuta diferite semnale distinctive ale virusului SARS-CoV.

Există mai multe tipuri de teste, în funcție de modul lor de acțiune:

1. Teste RT-PCR care pun în evidență materialul genetic al virusului SARS-CoV:

Aceste teste nu se găsesc în farmacii, se fac de către personalul de specialitate în laboratoare de analiză.

• Reprezintă standardul de diagnostic COVID 19
• Metoda recomandată în prezent pentru diagnosticarea infecției cu SARS-CoV-2 este detecția ARN viral prin Real-Time RT-PCR (reverse-transcription polymerase chain reaction), acesta este detectabil în organism înainte de formarea anticorpilor sau înainte de apariția simptomelor bolii. Acest tip de test ne poate informa foarte devreme dacă o persoană are virusul dar și în timpul boli.

Este important de precizat că unul sau mai multe rezultate negative la testul de detecție a acidului nucleic viral nu exclud posibilitatea unei infecții cu virusul SARS-CoV-2, iar în context clinic sugestiv diagnosticul nu trebuie infirmat pe baza unui test negativ.

O serie de factori pot duce la un rezultat negativ la o persoană infectată:

• calitatea slabă a produsului recoltat, care conține puține material provenind de la pacient;
• produsul a fost colectat târziu sau foarte devreme în cadrul infecției;
• produsul nu a fost manipulat și expediat în mod corespunzător;
• motive tehnice legate de test, de exemplu mutația virusului sau inhibarea PCR.
• Dacă se obține un rezultat negativ la un pacient cu un indice ridicat de suspiciune pentru infecția cu virusul SARS-CoV-2, în special atunci când au fost colectate numai probe ale tractului respirator superior, ar trebui să fie colectate și testate, dacă este posibil probe suplimentare, inclusiv din tractul respirator inferior.

În mod frecvent, rezultatele testelor de tip RT-PCR și al celor serologice sunt eliberate în maxim 48 de ore de la recoltarea probelor biologice, timp necesar obținerii, prelucrării și interpretării rezultatelor.

2. Teste rapide bazate pe detecția de antigen:

Aceste teste se găsesc în farmacii. Testele pot fi de două tipuri, nazofaringiene sau din salivă.

Cercetările arată că testele rapide sunt corecte în procent de 99,9%. Acest lucru înseamnă că șansa de a obține un rezultat fals pozitiv este extrem de scăzută.

Testele rapide bazate pe detecția de antigen identifică prezența proteinelor coronavirusului (antigene virale) în probe de secreție nazofaringiană recoltate de la pacienți. Antigenele virale sunt proteine din structura virusului care determină răspunsul imun specific al organismului la acest virus. Secrețiile nazofaringiene de la pacient se pun pe o bandă de hârtie pe care sunt fixați anticorpi specifici coronavirusului SARS- CoV-2. Dacă secrețiile conțin antigen viral se va produce o reacție vizibilă între anticorpii fixați pe banda de hârtie și antigenele virale din secreții.

Testele rapide de detecție a acidului nucleic viral sunt deja o alternativă simplă și eficientă, care nu necesită personal cu expertiză înaltă, care pot fi foarte utile pentru diagnosticul rapid al personalului medical sau pacienților simptomatici. Ele sunt recomandate pentru situații de urgență (ATI) și locuri în care lipsește personalul cu experiența în diagnostic. Dezavantajul acestei metode este că rezultatul depinde de calitatea probei, de concentrația virală în secreția recoltată, pot să dea de multe ori rezultate negative la persoanele care au infecția, dau în multe cazuri rezultate pozitive greșite la persoane care sunt infectate cu alte tipuri de coronavirus (rezultate fals pozitive). Probele cu rezultat pozitiv trebuie confirmate cu teste RT-PCR.

Testele bazate pe salivă:

Cercetătorii spun că testele sunt mai ușoare și mai puțin invazive decât cele nazofaringiene. Factori care ar putea ajuta la creșterea numărului de teste au arătat acuratețe în detectarea infecției cu coronavirus pozitiv 83% din timp, în timp ce testele tamponului la nivelul nasului și gâtului au arătat 85% acuratețe, potrivit unei revizuiri.

Particulele de coronavirus sunt prezente atât în salivă, cât și în picături respiratorii, deci sunt detectabile în salivă utilizând același tip de analiză pe care o efectuăm asupra fluidelor colectate cu tampoane nazofaringiene (numite și teste tampon nazal COVID-19). Testarea de laborator își propune să identifice prezența genomului viral în proba de salivă folosind metode moleculare similare cu cele utilizate pentru testarea tamponului nazal.

Testul rapid antigenic ar trebui efectuat în maxim 5 zile de la data debutului sau maxim 7 zile după data expunerii.

Rezultatul unui test antigen, depinde de producător și se obține între 5-20 minute.

3. Tehnologia CRISPR-Cas12-13:

Un program simplu și foarte versatil bazat pe un panel genetic care analizează concomitent secvenţierea lanţului ARN și ADN. Testul permite oferirea unui rezultat privind prezenţa sau absenţa SARS-CoV-2 în 30-40 de minute. Spre deosebire de metodele bazate pe RT-PCR, metodele de detectare a acidului nucleic bazate pe CRISPR pot funcţiona la o temperatură constantă (de exemplu, 37°C), fără a fi nevoie de un ciclu termic scump. Acest tip de test este în curs de evaluare.

4. Teste rapide bazate pe detecția de anticorpi:

Testele serologice (prin preluare de probe de sânge) evidențiază anticorpii specifici SARS-CoV-2 de tip IgM si IgG. Detecția anticorpilor specifici anti-SARS CoV2 de tip IgM (suportul răspunsului imun primar) va permite evidențierea infecțiilor acute, însă cu un interval timp de latență (minim 7 zile postinfecție).

Detecția anticorpilor specifici tip IgG, sunt cei care apar după vindecare pot avea valori de 4 ori mai mari în faza de convalescență, comparativ cu titrul identificat în faza acută, pot fi utilizate drept criteriu de diagnostic pentru pacienții suspecți de infecție SARS-CoV-2 cu rezultate negative la testele PCR. Anticorpii IgG, inclusiv IgG, persistă cel puțin câteva luni la majoritatea persoanelor, dar durata exactă a timpului în care anticorpii persistă după infecție este necunoscută.

5. Teste serologice de laborator:

În momentul în care organismul este expus coronavirusului, sistemul imun va reacționa prin producerea de anticorpi. Testele serologice bazate pe tehnici de laborator robuste (precum ELISA - metoda imunoenzimatică, chemoluminiscență, etc), aplicabile doar în laboratoarele clinice, au posibilitatea de a măsura nivelul anticorpilor IgM si IgG produși de organism atunci când este expus la infecția COVID-19. Testele serologice de laborator se fac utilizând probe de sânge venos recoltat de la pacient.

În farmacii se întâlnesc următoarele tipuri de teste:

Test Combo covid19/influenza A+B nazofaringian x2buc, sunt teste imunocromatografice care pot detecta diferențial antigenele specific virusurilor SARS CoV-2, inclusiv pentru noile tulpini apărute și gripă de tip A sau B, cu un nivel de acuratețe foarte ridicat pentru oricare dintre cele trei tipuri de infecții virale (gripă).

AndLucky TEST ANTIGEN SARS-CoV2 (din Saliva) x 5buc, sunt teste imunocromatografice pentru detectarea rapidă și calitativă a antigenului sindromului respirator acut sever (SARS-CoV-2) care se extrage din exsudatul orofaringian (din Saliva). Testul trebuie utilizat ca un ajutor pentru diagnosticarea infecției cu (SARS-CoV2).

Test rapid (tip casetă) Biocredit pentru detectarea calitativă a antigenului SARS-CoV-2, din proba prelevată pe tampon nazofaringian se prezintă ca un sistem cu două culori, ușor de utilizat (linie de control: roșie, linie de test: neagră).

Caracteristici de performanță în comparație cu testele PCR :

• Sensibilitate clinică: 92,0%
• Specificitate clinică: 98%

Timp de testare scurt : 5 ~ 8 min (dupa prelevarea probelor). Nu necesită aparate de citire.

Test rapid Antigen Covid19 saliva x1ct kit (Realy), dispozitivul de testare rapidă antigen COVID-19 este destinat detectării calitative a antigenelor SARS-CoV-2 în saliva umană de la persoanele suspecte de infectarea cu coronavirus.

Testele rapide COVID-19 sunt destinate uzului profesional. NU se recomandă utilizarea lor acasă, pentru autotestare.

Bibliografie:

1. https://www.pulmonologyadvisor.com/home/topics/diagnostics/viral-testing-may-reduce-antibiotic-use-in-severe-lower-respiratory-infection/
2. Understanding PCR, Academic Press, 2017, Pages 45-52, Chapter 4 - Quantitative PCR: Things to Consider, Sarah Maddocks, Rowena Jenkins, Editor(s): Sarah Maddocks, Rowena Jenkins, ISBN 9780128026830, https://doi.org/10.1016/B978-0-12-802683-0.00004-6 
3. www.ecdc.europa.eu 
4. Ghid de diagnostic pentru COVID-19 recomandat de Comisia de Microbiologie Medicala a ministerului Sanatatii si Comisia de microbiologie Medicala a Colegiului Medicilor din Romania, www.ms.ro 
5. Laboratory testing for 2019 novel coronavirus (2019-nCoV) in suspected human cases, interim guidance, 19 March 2020, WHO, www.who.int www.centerforhealthsecurity.org 
6. https://www.cdc.gov/coronavirus/2019-ncov/symptoms-testing/testing.html 
7. https://www.medicaldevice-network.com/features/types-of-covid-19-test-antibody-pcr-antigen/ 
8. https://www.nhs.uk/conditions/coronavirus-covid-19/testing/regular-rapid-coronavirus-tests-if-you-do-not-have-symptoms/ 
9. https://gov.wales/lateral-flow-testing-people-without-symptoms 
10. https://www.srm.ro/media/2020/04/recomandarea-comisiilor-de-microbiologie-medicala-diagnostic-sars-2.pdf 
11. https://www.viata-medicala.ro/ars-medici/metode-utilizate-in-diagnosticul-infectiei-cu-sars-cov-2-18489 
12. Dan JM, Mateus J, Kato Y, Hastie KM, Faliti CE, Ramirez SI, et al. Immunological memory to SARS-CoV-2 assessed for greater than six months after infection. bioRxiv. 2020(10.1101/2020.11.15.383323). 
13. https://www.mdanderson.org/cancerwise/do-covid-19-coronavirus-saliva-tests-work.h00-159384312.html 
14. https://www.healthline.com/health-news/noninvasive-saliva-tests-for-covid-19-as-effective-as-nose-throat-swabs